核酸检测检查的是什么

2026-08-17

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管蔚 副主任医师 江苏省人民医院 普通外科

管蔚副主任医师

江苏省人民医院 普通外科

核酸检测检查的是病毒特异性基因片段。检测原理基于聚合酶链反应技术,通过扩增病毒核糖核酸的特定序列来确认感染。检测步骤包括样本采集、核酸提取、扩增反应和结果判读。以下为详细说明。

1.检测靶点:

新冠病毒核糖核酸包含多个保守基因区域,如开放阅读框1ab基因、核衣壳蛋白基因和包膜蛋白基因。检测试剂盒通常针对其中2至3个靶标进行设计,以提高特异性。例如,中国国家药品监督管理局批准的试剂盒多选用开放阅读框1ab和核衣壳蛋白基因作为双重靶点,避免因病毒变异导致漏检。

2.样本类型:

常用样本包括鼻咽拭子、口咽拭子、痰液和肺泡灌洗液。鼻咽拭子采集需将拭子插入鼻腔至咽后壁,旋转停留15至30秒;口咽拭子则擦拭双侧扁桃体和咽后壁。痰液样本要求患者深咳后收集,肺泡灌洗液仅用于重症患者。不同样本的检出率存在差异,肺泡灌洗液灵敏度最高,可达95%以上,但操作复杂。

3.检测流程:

第一步,样本放入含病毒保存液的试管中,4摄氏度下运输至实验室。第二步,使用裂解液破坏病毒包膜,释放核糖核酸。第三步,通过磁珠法或柱提法纯化核糖核酸,去除蛋白质和杂质。第四步,将纯化后的核糖核酸加入反应体系,包括逆转录酶、脱氧核糖核苷三磷酸、引物和探针。第五步,在实时荧光定量聚合酶链反应仪中运行,温度循环设定为50摄氏度逆转录30分钟,95摄氏度预变性2分钟,然后95摄氏度变性15秒、60摄氏度退火延伸30秒,重复40至45个循环。

4.结果判读:

循环阈值是判定依据。循环阈值小于35为阳性,表示病毒载量较高;循环阈值在35至40之间为弱阳性,需重复检测确认;循环阈值大于40或无扩增曲线为阴性。假阴性可能由样本采集不规范、病毒载量低或试剂盒灵敏度不足导致,假阳性则多源于实验室污染。

5.检测时效:

常规聚合酶链反应检测需2至4小时,但加上样本运输和报告审核,实际出结果时间为6至24小时。快速检测设备可将时间压缩至30至60分钟,但灵敏度略低。大规模筛查时,常采用混采检测,将5至10个样本混合检测,若混合样本阳性再逐一复测,效率提升3至5倍。


核酸检测是诊断病毒感染的金标准,但需注意采样时机和操作规范。感染初期病毒载量低时可能无法检出,建议在症状出现后3至7天内检测。检测前30分钟避免进食、吸烟或嚼口香糖,防止样本污染。任何检测结果均需结合流行病学史和临床表现综合判断,不可单独作为诊断依据。

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